TY - THES T1 - In vitro Untersuchung potentieller Ferredoxine und Ferredoxin Reduktasen des Myxobakteriums Sorangium cellulosum So ce56 A1 - Ewen,Kerstin Maria Y1 - 2010/04/22 N2 - Dokument vorübergehend gesperrt Myxobakterien — insbesondere Mitglieder des Genus Sorangium — sind für ihr biotechnologisches Potential als Produzenten pharmazeutisch wichtiger Sekundärmetabolite bekannt. Cytochrome P450 (CYPs) sind in die Bildung verschiedener myxobakterieller Substanzen involviert. Da die in Bakterien verbreiteten Klasse I CYPs auf Ferredoxine und Ferredoxin Reduktasen als Elektronenmediatorproteine angewiesen sind, wurden entsprechende Kandidaten in der S. cellulosum So ce56 Genomsequenz identifiziert. Es wurden acht Ferredoxine (Fdx1-8) und zwei Ferredoxin Reduktasen (FdRA/B) kloniert, heterolog exprimiert und charakterisiert. Die unterschiedlichen Fdx—FdR Kombinationen wurden hinsichtlich des Elektronentransfers untereinander und ihrer Aktivität in CYP Systemen untersucht. Zwei Ferredoxine übertrugen Elektronen auf das endogene S. cellulosum So ce56 CYP260A1 und konnten von beiden Ferredoxin Reduktasen reduziert werden, so dass die CYP260A1 katalysierte Reaktion insgesamt von vier Fdx-FdR Kombinationen unterstützt wurde. Diese Variabilität des Elektronentransportweges könnte in vivo von Bedeutung für die Regulation der CYP Aktivität sein. Darüber hinaus wurde nachgewiesen, dass die Elektronentransferkette aus FdRB und Fdx1 zwar nicht mit CYP260A1 arbeitet, jedoch die Aktivität des heterologen CYP11A1 aus Säugern unterstützt. Fdx1 ist das erste bakterielle Fdx, das mit diesem Säuger CYP eine funktionelle Redoxkette bildet. KW - Ferredoxin-NADP-Reductase KW - Eisen-Schwefel-Proteide KW - Cytochrom P-450 CY - Saarbrücken PB - Universitäts- und Landesbibliothek AD - Postfach 151141, 66041 Saarbrücken UR - http://scidok.sulb.uni-saarland.de/volltexte/2010/3045 ER -