TY - THES T1 - Charakterisierung neuer Interaktionspartner von Kerntransportfaktoren in Sacharomyces cerevisiae A1 - Lobert,Isabell Y1 - 2010/06/17 N2 - Mit dem Zwei-Hybrid System wurden neue Interaktionspartner für das Importin Kap114 identifiziert. Darunter waren die Histon-Methyltransferase Set2, Sda1, das mRNA-Export- Adapterprotein Yra1 sowie Nis1 und die Proteinkinase Hsl1, die beide in die Regulation der Mitose involviert sind. Die nähere Charakterisierung von Yra1 identifizierte ein zweites, C-terminales Kernimportsignal, an das Kap114 und Nmd5 bevorzugt binden, während Pse1 das Nterminale NLS präferiert. Mittels Lokalisierungsstudien wurde nachgewiesen, dass Yra1 Gsp1-abhängig über die Importine Pse1 und Kap123 in den Kern transportiert wird. Nmd5 und Kap114 scheinen Nebenwege zu vermitteln. Der detektierte trimere Komplex von Yra1 und Nap1 mit Kap114 bzw. Pse1 weist auf einen möglichen Coimport von Nap1 und Yra1 hin. Hsl1 wurde, abhängig von seiner Septinbindungsdomäne, an der Sprossungszone einer sich teilenden Hefezelle ("bud neck") lokalisiert. Es wurde nachgewiesen, dass der N-Terminus von Hsl1, der die Kinasefunktion trägt, eine NLS besitzt, Gsp1-abhängig in den Nukleus importiert wird und Pse1 und Kap123 in diesen Import involviert sind. Auch Hsl1 bildet trimere Komplexe mit Kap114 bzw. Pse1 und Nap1, was auf einen Coimport, aber auch auf eine mögliche Chaperonfunktion der Kerntransportfaktoren und Nap1 hinweist. Über Deletionsmutanten wurde gezeigt, dass Kap114 in der mitotischen Signalkaskade des Morphogenese-Kontrollpunktes agiert, die in der Hemmung von Swe1 mündet, und zwar auf der gleichen Ebene wie Nap1. KW - Yeast-Two-Hybrid-System KW - Saccharomyces cerevisiae KW - Mitoseregulation KW - Kap114 CY - Saarbrücken PB - Universitäts- und Landesbibliothek AD - Postfach 151141, 66041 Saarbrücken UR - http://scidok.sulb.uni-saarland.de/volltexte/2010/3160 ER -