TY  - THES
T1  - Charakterisierung von CYP11B2 Mutanten in Schizosaccharomyces pombe und Analyse des Potentials der Hefe als 18-Hydroxycorticosteron-Produzent
A1  - Giese,Ming Kwai
Y1  - 2012/04/24
N2  - CYP11B2 katalysiert die Aldosteron–Synthese von DOC über B und 18OHB. Da CYP11B2 Mutationen die Ursache für Aldosteronsynthase–Defizienz sind, liefern Studien zu Mutationen und ihren Folgen auf die Enzymaktivität wertvolle Beiträge für die Diagnose und Therapie von Hypoaldosteronismus. In dieser Arbeit wird die Entwicklung eines schnellen und preiswerten Ganzzellsystem zur enzymatischen Analyse von CYP11B2 Mutanten vorgestellt. Das Prinzip beruht auf der heterologen Expression der Mutanten in S. pombe, gefolgt von der Analyse der CYP11B2–abhängigen Biotransformation von DOC. Nach Optimierung der Systemparameter wurden zehn CYP11B2 Mutationen untersucht. Vergleiche mit aus Zellkulturstudien gewonnenen Literaturdaten bestätigen die Eignung des Hefesystems zur Analyse der Effekte von CYP11B2 Mutationen. Somit stellt das etablierte System eine innovative, kostengünstige und Radioaktivitätsunabhängige Alternative zur Charakterisierung von CYP11B2 Mutanten dar. Des Weiteren wurde mithilfe des zuvor etablierten Systems das biotechnologische Potential von S. pombe als 18OHB–Produzent untersucht. Hiefür wurden weitere 18 CYP11B2 Mutanten untersucht. Es musste jedoch festgestellt werden, dass neben der noch optimierungsbedürftigen Enzymaktivität ein weiterer limitierender Faktor darin besteht, dass 18OHB in wässrigem saurem Milieu dazu neigt, Umlagerungsprodukte zu bilden. Daher muss gefolgert werden, dass Mikroorganismen zum jetzigen Wissensstand zur 18OHB–Produktion ungeeignet sind.
KW  - Aldosteron
KW  - Cytochrome
KW  - Hypoaldosteronismus
KW  - 18-Hydroxycorticosteron
CY  - Saarbrücken
PB  - Universitäts- und Landesbibliothek
AD  - Postfach 151141, 66041 Saarbrücken
UR  - http://scidok.sulb.uni-saarland.de/volltexte/2012/4795
ER  -